消毒手术室房间有紫外线照射和化学气体熏蒸两种方法。
一、紫外线消毒法：多用悬吊紫外线灯管（电压220V，波长253。7mm，功率30W），距离1米处，强度＞70uw/c㎡，每立方米空间用量＞115W，照射时间大于30分钟。室温宜在20～35C，湿度小于60%。
使用过程中、紫外线强度逐渐降低，一般有效期为1000小时，因此，需有消毒效果监测记录。
二、化学气体熏蒸法：
1、乳酸熏蒸法
用80%乳酸12ml/m3加12ml，加热后所产生的气体能杀灭空气中细菌。从加热后手术间要封闭4～6小时。
2、福尔马林（甲醛）熏蒸法
用40%甲醛4ml/m3加水2ml/m3与高锰酸钾2g/m3混合，通过化学反应产生气体能杀灭空气中细菌。手术间封闭12～24小时。
